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7-14
離子色譜柱是一種用來改善在反相色譜中保留較差的強極性物質保留行為的色譜技術。它通過采用強極性固定性,并且結合高比例有機相/低比例水相組成的流動相來實現這一目的。而這樣的流動相組成尤其有利于提高電噴霧離子化質譜的靈敏度。離子色譜柱的分離機制:分離機理在目前還存在著爭議,主要包括以下三個方面:(1)分配機理(2)離子交換(3)偶極-偶極相互作用。更多的試驗現象則表明HILIC色譜柱的保留機理包含氫鍵作用、偶極作用和靜電作用等多種次級效應,很難將其區分開來。影響離子色譜柱保留的主要...
7-12
色譜柱在使用前,最好進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進行,只有這樣,測得的結果才有可比性。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。樣品的前處理過程:(1)最好使用流動相溶解樣品。(2)使用預處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產生不可逆吸附的雜質。(3)使用0.45μm或0.22μm的過濾膜過濾除去微粒雜質。實際使用中,液相色譜柱有可能會失效,常見的原因有:1、色譜柱...
7-6
使用高效液相色譜柱做HPLC分析時,通常會遇到色譜柱柱壓過高等情況,色譜柱柱壓過高原因何在?怎么解決呢?高效液相色譜柱柱壓高原因與解決方法:色譜柱柱壓過高是HPLC柱用戶最常碰到的問題。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的問題,您可按下面步驟檢查問題的起因:1、拆去保護柱,看柱壓是否還高,否則是保護柱的問題,若柱壓仍高,再檢查2、把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查3、將柱子的進出口反過來接在儀器上,用10倍柱體積的流動相沖洗柱...
7-5
液相色譜柱流動相的配制和流速的選擇1、流動相的配制液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點:(1)流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。(2)流動相與樣品不產生化學反應(3)流動相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動相的黏度)。(4)流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器,最好使用對紫外吸收較低的溶劑配制...
6-28
氣相色譜柱在石油、化工、生物化學、醫藥衛生、食品工業、環保等方面應用很廣。它除用于定量和定性分析外,還能測定樣品在固定相上的分配系數、活度系數、分子量和比表面積等物理化學常數。氣相色譜柱柱溫的選擇:柱溫是影響分析時間和分離度的重要因素。選擇柱溫的依據是樣品的沸點范圍,固定液的配比,允許使用溫度,以及檢測器的靈敏度。柱溫主要影響分配系數、容量因子以及組分在流動相和固定相中的擴散系數,從而影響分離度和分析時間。選擇溫柱的原則,一般是在使難分離物質對達到要求的分離度條件下,盡可能采...
6-23
液相色譜柱是液相色譜分離能力的核心部分,其規格有哪些呢?按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱長10~30cm;⑥生產制備柱內徑可達幾十厘米。液相色譜柱的一些注意事項:1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動溫度的突然變化...
6-18
UHPLC色譜柱特點:●高純球形硅膠填料。●粒徑有1.8μm和2.2μm鍵合各種官能團?!駲C械穩定性優異,可耐受壓力至10000psi?!裰行?、酸性、堿性化合物峰形美,柱效高。●重現性好。UHPLC色譜柱的維護措施:1、使用保護柱2、大多數柱的PH穩定范圍是2-7.5,盡可能在此范圍內使用3、避免流動相組成及極性有劇烈變化4、流動相使用前必須經脫氣和過濾處理5、如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,要在實驗完畢將柱子沖洗干凈6、壓力升高時更換保護柱
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